KLH.Monkey-IgG医薬品の免疫毒性試験に関するガイドラインICH S8 では、免疫毒性の標的が特定されていない場合には T 細胞依存性抗体産生試験(TDAR、T cell Dependent Antibody Reaction)が推奨されています。
TDAR はT 細胞依存性抗原とされている、たとえば KLH (Keyhole limpet hemocyanin)を投与して一次抗原刺激によるIgM 性抗体の産生、更に二次抗原刺激後のクラス・スイッチによるIgG 性抗体の産生を観察します。本キットはサル血液中の IgM 性の抗KLH 濃度を簡単に測定できるもので、上記の目的には最適です。サル抗KLH-IgM 測定キットと併せてご使用ください。

 

 

 

 

 

キットの特徴

● 短時間(全反応時間:2時間20分)で測定可能。
● 微量な検体で測定可能。
● 環境に優しい防腐剤を使用。
● 全ての試薬が溶液タイプで即座に使用可能。
● 高い測定精度と再現性。

 

キットの構成

 

構 成 品 状 態 容 量
(A) KLH固相化 96 ウエルプレート 洗浄後使用 96 wells(8×12)/1 枚
(B) サル抗KLHIgG標準溶液(500 ng/mL) 希釈後使用 200 μL/1 本
(C) 緩衝液 そのまま使用 100 mL/1 本
(D) HRP結合抗サルIgG抗体 希釈後使用 100 μL/1 本
(F) 発色液(TMB) そのまま使用 12 mL/1 本
(H) 反応停止液(1M H2SO4)※取扱注意 そのまま使用 12 mL/1 本
( I ) 濃縮洗浄液(10×) 希釈後使用 100 mL/1 本
プレートシール   3 枚
取扱説明書   1 部

 

交差性

動物種 対象物質 反応性及び反応率(%)
Monkey IgG 100
IgM
IgA
IgE
Human IgG 110
IgM
IgA
IgE N.T.(未試験)

―:交差反応性なし

※交差率は、10 000 ng/mL濃度時のデータです

サルの血清・血漿

50 μ L/well(希釈検体)

※検体はキット付属の緩衝液を用いて検量線範囲内に入るように調製してください。

※非特異反応を回避する為,検体は100倍以上希釈してください。

1.56~100 ng/mL(検量線範囲)

精度試験(アッセイ内変動)

検体 QC-1 QC-2 QC-3 QC-4 QC-5
1 1.15 3.85 49.3 87.5 138
2 1.21 3.92  46.8  85.3  145
3 1.09 3.81  48.9  88.1  139
4 0.995 3.75  51.3  85.9  152
5 1.12 3.99  48.2  84.8  143
6 1.11 4.05 51.8 84.5 132
7 0.994 4.21 52.1 89.1 158
8 1.23 4.13 50.4 90.1 149
mean 1.11 3.96  49.9  86.9  145
SD 0.087 0.16  1.9  2.1  8.4
CV(%) 7.8 4.1  3.8  2.4  5.8

単位:ng/mL

 

再現性試験(アッセイ間変動)

測定日/検体 GB FG
0日目 9.16 36.8
1日目 9.53 38.1
2日目 9.15 39.5
3日目 9.49 36.0
mean 9.33 37.6
SD 0.21 1.5
CV(%) 2.2 4.1

単位:ng/mL, n=3

 

希釈直線性試験

3血清検体を連続的に希釈用緩衝液で2段階希釈し測定した結果、

直線回帰のR2は0.9996から1でした。

 

非臨床研究用測定試薬

免疫・アレルギー研究分野

TDAR(T cell Dependent Antibody Responce)試験用

シバヤギコード
和光コード
品名 検量線範囲 検体量(希釈検体) 希望納入価格
(消費税別)
AKRKG-010
632-13751
レビス KLH(TDAR)ラットーIgG ELISA KIT (*1) 0.47~30 ng/mL 50 μL 52,000円
AKRKM-010
639-13761
レビス KLH(TDAR)ラットーIgM ELISA KIT(*2) 3.13~200 ng/mL 50 μL 52,000円
AKMOKG-014
637-30781
レビス KLH(TDAR)サル-IgG ELISA KIT(*3) 1.56~100 ng/mL 50 μL 62,000円
AKMOKM-014
634-30791
レビス KLH(TDAR)サル-IgM ELISA KIT(*4) 15.6~1,000 ng/mL 50 μL 62,000円
ACMOKG シバヤギキット用コントロールセット
(サル抗KLH-IgG抗体)
250 μL×2濃度,冷凍 11,000円
ACMOKM シバヤギキット用コントロールセット
(サル抗KLH-IgM抗体)
250 μL×2濃度,冷凍 11,000円

(*1)非特異反応を回避する為,検体は500倍以上希釈してください

(*2)非特異反応を回避する為,検体は200倍以上希釈してください

(*3)非特異反応を回避する為,検体は100倍以上希釈してください

(*4)非特異反応を回避する為,検体は100倍以上希釈してください

 

■製品に関するお問い合わせはsyc-info@shibayagi.co.jpまで