医薬品の免疫毒性試験に関するガイドラインICH S8 では、免疫毒性の標的が特定されていない場合には T 細胞依存性抗体産生試験（TDAR、T cell Dependent Antibody Reaction）が推奨されています。TDAR はT 細胞依存性抗原とされている、たとえば KLH (Keyhole limpet hemocyanin)を投与して一次抗原刺激によるIgM 性抗体の産生、更に二次抗原刺激後のクラス・スイッチによるIgG 性抗体の産生を観察します。本キットはラット血液中の IgM 性の抗KLH 濃度を簡単に測定できるもので、上記の目的には最適です。ラット抗KLH-IgG 測定キットと併せてご使用ください。

 

 

キットの特徴

●　短時間（全反応時間：2時間20分）で測定可能。
●　微量な検体で測定可能。
●　環境に優しい防腐剤を使用。
●　全ての試薬が溶液タイプで即座に使用可能。
●　高い測定精度と再現性。

 

キットの構成

 

構 成 品 状 態 容 量
(A) KLH固相化 96 ウェルプレート 洗浄後使用 96 wells（8×12）／1 枚
(B) 抗KLHラットIgG標準溶液（300 ng/mL） 希釈後使用 200 μL／1 本
(C) 緩衝液 そのまま使用 100 mL／1 本
(D) HRP結合抗ラットIgG抗体 希釈後使用 100 μL／1 本
(F) 発色液（TMB） そのまま使用 12 mL／1 本
(H) 反応停止液（1 M H2SO4）※取扱注意 そのまま使用 12 mL／1 本
( I ) 濃縮洗浄液（10×） 希釈後使用 100 mL／1 本
プレートシール   3 枚
取扱説明書   1 部

ラットの血清・血漿

50 μL/ウェル（希釈検体）

※検体はキット付属の緩衝液を用いて検量線範囲内に入るように調製してください。

※非特異反応を回避する為，検体は500倍以上希釈してください。

 

交差性

動物種 対象物質 反応性及び反応率（％）
Rat IgG 100
IgM ―
IgA ―
IgE ―
Mouse IgG ―
IgM ―
IgE ―

―：交差反応性なし

※交差率は、3000 ng/mL濃度時のデータです

0.47～30 ng/mL（検量線範囲）

精度試験（アッセイ内変動）

検体 A B
1 11.2 3.93
2 11.0 3.74
3 11.3 3.83
4 11.1 3.70
5 11.5 3.99
mean 11.2 3.84
SD 0.190 0.121
CV(%) 1.7 3.2

単位：ng/mL

再現性試験（アッセイ間変動）

測定日/検体 E F G
0日目 15.3 3.84 0.969
1日目 15.3 3.84 0.954
2日目 15.4 3.83 0.958
3日目 15.2 3.82 0.976
mean 15.3 3.83 0.965
SD 0.0615 0.0067 0.0102
CV(%) 0.40 0.18 1.1

単位：ng/mL, n=4

添加回収試験

検体C

添加量 実測値 回収量 回収率(%)
0.00 1.18 – –
0.466 1.65 0.470 101
1.40 2.53 1.35 96.4
2.33 3.48 2.30 98.7

単位：ng/mL, n=2

検体D

添加量 実測値 回収量 回収率(%)
0.00 12.5 – –
4.90 17.2 4.70 95.9
10.7 23.1 10.6 99.1
15.4 27.2 14.7 95.5

単位：ng/mL, n=2

希釈直線性試験

2血清検体を連続的に希釈用緩衝液で3段階希釈し測定した結果、

直線回帰のR2は0.9992から0.9998でした。

 

非臨床研究用測定試薬

免疫・アレルギー研究分野

TDAR(T cell Dependent Antibody Responce)試験用

シバヤギコード
和光コード		 品名 検量線範囲 検体量（希釈検体） 希望納入価格
（消費税別）
AKRKG-010
632-13751		 レビス　KLH(TDAR)ラットｰIgG ELISA Kit (＊１) 0.47～30 ng/mL 50 μL 60,000円
AKRKM-010
639-13761		 レビス　KLH(TDAR)ラットｰIgM ELISA Kit(＊２) 3.13～200 ng/mL 50 μL 60,000円
AKMOKG-014
637-30781		 レビス　KLH(TDAR)サル-IgG ELISA Kit(＊３) 1.56～100 ng/mL 50 μL お問い合わせください
AKMOKM-014
634-30791		 レビス　KLH(TDAR)サル-IgM ELISA Kit(＊４) 15.6～1000 ng/mL 50 μL お問い合わせください
ACMOKG シバヤギキット用コントロールセット
（サル抗KLH-IgG抗体）(＊５)		 250 μL×2濃度，冷凍 11,000円
ACMOKM シバヤギキット用コントロールセット
（サル抗KLH-IgM抗体）(＊６)		 250 μL×2濃度，冷凍 11,000円

(＊1)非特異反応を回避する為，検体は500倍以上希釈してください

(＊2)非特異反応を回避する為，検体は200倍以上希釈してください

(＊3)非特異反応を回避する為，検体は100倍以上希釈してください

(＊4)非特異反応を回避する為，検体は100倍以上希釈してください

(＊5)AKMOKG-014とセットでのみ対応

(＊6)AKMOKM-014とセットでのみ対応

■製品に関するお問い合わせはwksb-info@fujifilm.comまで