アルカリホスファターゼ(ALP)は肝臓をはじめ、骨、小腸などに広く分布している酵素です。特に骨代謝の研究分野では骨形成マーカーの1つとして用いられています。
本品はp-ニトロフェニルりん酸を基質としたアルカリホスファターゼ活性測定キットで、マイクロプレートリーダーによる多検体測定に有用です。

 

キットの構成

構 成 品 容 量
(1)基質錠(溶解時-ニトロフェニルりん酸二ナトリウム6.7 mmol/L) 10錠
(2)基質溶解液(2.0 mmol/L塩化マグネシウム含有0.1 mol/L炭酸塩緩衝液pH 9.8) 50 mL/1 本
(3)反応停止液(0.2 mol/L水酸化ナトリウム溶液) 50 mL/1 本
(4)標準液(0.5 mmol/L p-ニトロフェノール溶液) 5 mL/1 本

※マイクロプレート法の場合、測定回数は500回
※基質錠は1錠余分に入っています。

 

測定原理

p-ニトロフェニルりん酸を含む炭酸塩緩衝液(pH 9.8)中で検体を作用させると、検体中のアルカリホスファターゼによりp-ニトロフェニルりん酸はp-ニトロフェノールとりん酸に分解され、生成したp-ニトロフェノールはアルカリ性側で黄色を呈します。この405 nmの吸光度を測定することにより検体中のアルカリホスファターゼ活性値を求めます。

  • 検体として血清/血漿を用いる場合は、採血後なるべく速やかに測定してください。
  • 採取後長期に保存する場合は-35 ℃以下で凍結保存してください。
  • 抗凝固剤のEDTAは負誤差を与えますので使用しないでください。
  • りん酸塩は負誤差を与えますので、混入しないように注意してください。
  • ビリルビン、溶血は測定値にほとんど影響を与えません。
  • 検体を希釈する必要がある場合は蒸留水または適当な緩衝液で希釈してください。ただし、りん酸系の緩衝液は使用しないでください。
  • 試薬は指定された保存条件で保管し、使用期限の過ぎたものは使用しないでください。
  • 直射日光を避けて操作してください。
  • 試薬採取の際、ピペットからの汚染に注意してください。
  • 試薬にはフェノール類および水酸化ナトリウムが含まれていますので取り扱いには十分注意してください。
  • 本品は体外診断用としては使用できません。

測定範囲:0.0625~0.5 mmol/L
再現性:C.V.<10 %

 

精度試験(アッセイ内変動)

ヒト血清検体 A B
1 0.768 0.383
2 0.761 0.368
3 0.746 0.367
4 0.753 0.378
5 0.739 0.370
6
0.738 0.386
mean 0.751 0.375
SD 0.012 0.008
CV(%) 1.6 2.2

 

マウス血清検体 C D
1 0.503 0.269
2 0.490 0.268
3 0.508 0.263
4 0.485 0.280
5 0.522 0.264
6
0.507 0.281
mean 0.502 0.271
SD 0.014 0.008
CV(%) 2.7 2.9

 

ラット血清検体 E F
1 0.568 0.325
2 0.580 0.324
3 0.571 0.311
4 0.568 0.332
5 0.578 0.332
6
0.580 0.333
mean 0.574 0.326
SD 0.006 0.008
CV(%) 1.0 2.6

単位:mmol/L

再現性試験(アッセイ間変動)

ヒト血清検体

測定日/検体 1 2
0日目 0.735 0.494 0.359 
1日目 0.734 0.489 0.367
2日目 0.733 0.504 0.367
3日目 0.717 0.490 0.350
mean 0.730 0.494  0.361
CV(%) 1.0 1.2 1.9 

 

マウス血清検体

測定日/検体 1 2
0日目 0.489 0.380 0.254
1日目 0.490 0.369 0.240
2日目 0.505 0.387 0.263
3日目 0.489 0.372 0.234
mean 0.493 0.377 0.248
CV(%) 1.4 1.9 4.6

 

ラット血清検体

測定日/検体 1 2
0日目 0.565 0.436 0.325
1日目 0.544 0.433 0.318
2日目 0.601 0.478 0.352
3日目 0.571 0.435 0.323
mean 0.570 0.446 0.330
CV(%) 3.6 4.2  4.0

単位:mmol/L, n=3

添加回収試験

ヒト血清検体

添加量 測定値 回収量 回収率(%)
0.429
0.097 0.527 0.098 101.0
0.197 0.587 0.158 80.2
0.297 0.672 0.243 81.8
0.507 0.866 0.437 86.2


マウス血清検体

添加量 測定値 回収量 回収率(%)
0.284
0.060 0.343 0.059 98.3
0.127 0.399 0.115 90.6
0.251 0.507 0.223 88.8
0.500 0.753 0.469 93.8


ラット血清検体

添加量 測定値 回収量 回収率(%)
0.374
0.060 0.439 0.065 108.3
0.127 0.483 0.109 85.8
0.251 0.598 0.224 89.2
0.500 0.855 0.481 96.2

単位:mmol/L, n=2

 

希釈直線性試験

測定範囲に入るよう付属の緩衝液で調製後、連続的に緩衝液で4段階希釈し測定した結果。
希釈直線性(ヒト検体)R2は0.9997
希釈直線性(マウス検体)R2は0.9989
希釈直線性(ラット検体)R2は0.9999

検体測定例

ヒト検体

検体 測定値(mean) SD CV(%)
プール血清、男性 0.556 0.003 0.5
プール血漿(EDTA)、男性 0.070 0.001 1.2

 

マウス検体:CD-1(ICR)、オス、血清

検体 測定値(mean) SD CV(%)
No.1 0.310 0.013 4.2
No.2 0.453 0.001 0.2
No.3 0.495 0.015 3.0
No.4 0.442 0.013  2.9 
No.5 0.373  0.002 0.5

 

マウス検体:CD-1(ICR)、オス、血漿(ETDA)

検体 測定値(mean) SD CV(%)
No.1 0.080 0.001 1.5
No.2 0.208 0.008 3.8
 No.3  0.098  0.000  0.1
 No.4  0.059  0.004  6.5
 No.5  0.109  0.001 0.6 

 

ラット検体:SD、オス、血清

検体 測定値(mean) SD CV(%)
No.1 0.538 0.005 1.0
No.2 0.441 0.010 2.2
No.3 0.357 0.000 0.0
No.4 0.460 0.002 0.5
No.5 0.301 0.011 3.6

 

ラット検体:SD、オス、血漿(ETDA)

検体 測定値(mean) SD CV(%)
No.1 0.171 0.001 0.7
No.2 0.139 0.007 5.3
 No.3 0.260 0.004 1.4
 No.4 0.205 0.006 2.7
 No.5 0.172 0.002 1.2

単位:mmol/L, n=2

※抗凝固剤のEDTAは負誤差を与えますので使用しないでください。


  テスト スタンダード ブランク
基質緩衝液 100 μL 100 μL 100 μL
試料 検体 20 μL 標準液 20 μL 蒸留水 20 μL
プレートミキサーで1分間攪拌後、37 ℃15分間インキュベート
反応停止液 80 μL 80 μL 80 μL
プレートミキサーで1分間攪拌後、405 nmの吸光度をマイクロプレートリーダーで測定する

 

pdficonLABALP-M1 ラボアッセイ ALP

 

ご使用者様からの情報をお待ちしております

 

 

GLDH(Glutamate dehydrogenase)amate dehydrogenase (自動分析装置用試薬)

 

シバヤギコード
和光コード
品名 測定範囲 検体量 希望納入価格
(消費税別)
LABGLDH-RA
631-47771
ラボアッセイ GLDH-ラット(Aタイプ) 1~200 U/L(*) 15 μL
(日立LAbOSPECT003)
35,000円

*検量線範囲は100 U/Lまです。直線性は200 U/Lまで確認しています。

シバヤギコード
和光コード
品名 保存 容量 希望納入価格
(消費税別)
LABGLDH-RC
630-48581
添付文書の一例
ラボアッセイ GLDH-ラット用コントロール
LABGLDH-RAをご使用の際に測定精度管理用としてご利用ください。融解後良く攪拌し、希釈せずにご使用いただけるよう濃度調製しております(凍結融解の繰り返しはできません)。弊社で濃度測定した結果を添付文書に記載し出荷しております(左記添付文書の一例をご参照ください)。
凍結保存
保存温度:-35 ℃以下
有効期限:6ヶ月
500 μL/本 × 20本 40,000円

*濃度はロットごとに異なります。

■製品に関するお問い合わせはwksb-info@fujifilm.comまで