血清中の脂質は、トリグリセライド(中性脂肪)、コレステロール、りん脂質、遊離脂肪酸(NEFA)及び脂溶性ビタミン、カロチンなどの微量の脂溶性物質からなっています。超低比重リポ蛋白(VLDL ; very low density lipoprotein)やカイロミクロンの主要な構成成分であるトリグリセライドは食品中の油脂のエネルギー源やトランスポーターなど、代謝において重要な役割を果たします。

本品はN-エチル-N-(2-ヒドロキシ-3-スルホプロピル)-3,5-ジメトキシアニリンナトリウム(DAOS)を利用した青色発色系の酵素法試薬です。マイクロプレート法により、マウス血清中のトリグリセライド量の測定に用いることができます。用手法での測定も可能であり、また、ヒト血清中のトリグリセライドの測定を行うこともできます。

 

 

キットの構成

構 成 品   容 量
(1) 緩衝液 50 mmol/L グッド(PIPES) 緩衝液、pH 6.5   105 mL/1 本
(2) 発色剤  

105 mL用/1 本
  溶解時  
   リポプロテインリパーゼ 99 units/mL
   アデノシン-5’-三りん酸二ナトリウム三水和物(ATP) 1.7 mmol/L
   グリセロールキナーゼ 30 units/mL
   グリセロール-3-りん酸オキシダーゼ(GPO) 1.0 units/mL
   ペルオキシダーゼ(POD) 5.5 units/mL
   N-エチル-N-(2-ヒドロキシ-3-スルホプロピル)-3,5-ジメトキシアニリンナトリウム(DAOS) 0.54 mmol/L
   4-アミノアンチピリン 0.11 mmol/L
   アスコルビン酸オキシダーゼ 4.5 units/mL
(3) 標準液
   グリセリン
   (トリオレイン300 mg/dL相当)
   アジ化ナトリウム 0.05 %含有
 
31.2 mg/mL 
4 mL/1 本

※マイクロプレート法の場合、測定回数は350回、用手法の場合、測定回数は35回

測定原理

検体中のトリグリセライドは、リポプロテインリパーゼ(LPL)の作用によりグリセリンと脂肪酸に分解されます。生成したグリセリンは、ATP存在下でグリセロールキナーゼ(GK)の作用によりグリセロール-3- りん酸になります。生成したグリセロール-3-りん酸は、グリセロール-3-りん酸オキシダーゼ(GPO)の作用を受けて酸化され、同時に過酸化水素を生じます。生成した過酸化水素は、ペルオキシダーゼ(POD)の作用によりDAOS と4-アミノアンチピリンとを定量的に酸化縮合させ、青色の色素を生成させます。この青色色素の吸光度を測定することにより検体中のトリグリセライド濃度を求めます。

 

全血/血清/血漿検体

  • 採取後の検体は速やかに測定してください。
  • 溶血はわずかに正誤差を与えます。
  • アルコルビン酸はわずかに負誤差を与えます。
  • ビリルビンは測定値にほとんど影響を与えません。

測定範囲:100~888 mg/dL
再現性:C.V.<12 %

 

精度試験(アッセイ内変動)

ヒト血清検体 1 2
1 195 328
2 191 328
3 198 330
4 196 323
5 185 322
6
197 328
mean 194 327
SD 4.8 3.0
CV(%) 2.5 0.92

 

マウス血清検体 1 2
1 142 392
2 143 378
3 134 389
4 135 365
5 135 383
6
142 386
mean 139 382
SD 4.1 9.7
CV(%) 3.0 2.5

 

ラット血清検体 1 2
1 118 199
2 119 200
3 115 195
4 113 193
5 115 182
6
114 180
mean 116 192
SD 2.1 8.4
CV(%) 1.9 4.4

単位:mg/dL

再現性試験(アッセイ間変動)

ヒト血清検体

測定日/検体 3 4 5
0日目 537 261 135
1日目 552 275 137
2日目 554 275 135
3日目 546 272 137
mean 547 271 136
CV(%) 1.4 6.8 1.0

 

マウス血清検体

測定日/検体 3 4 5
0日目 566 263 150
1日目 558 259 140
2日目 540 263 139
3日目 587 294 137
mean 563 270 141
CV(%) 3.5 6.1 4.0

 

ラット血清検体

測定日/検体 3 4 5
0日目 568 268 143
1日目 614 276 144
2日目 592 275 144
3日目 609 287 141
mean 596 277 143
CV(%) 3.4 2.8 0.92

単位:mg/dL

添加回収試験

ヒト血清検体

添加量 測定値 回収量 回収率(%)
126
145 267 141 97.2
218 323 196 89.9
291 389 263 90.4
363 455 329 90.6


マウス血清検体

添加量 測定値 回収量 回収率(%)
133
129 268 136 105
194 342 209 108
258 409 276 107
323 448 315 97.5


ラット血清検体

添加量 測定値 回収量 回収率(%)
130
131 257 127 97.0
196 307 177 90.3
262 370 240 91.6
327 413 283 86.5

単位:mg/dL

 

希釈直線性試験

測定範囲に入るよう付属の緩衝液で調製後、連続的に緩衝液で4段階希釈し測定した結果。
希釈直線性(ヒト血清検体)R2は0.9996と0.9997
希釈直線性(マウス血清検体)R2は0.9993と0.9996
希釈直線性(ラット血清検体)R2は0.9988と0.999

検体測定例

ヒト検体

検体 測定値(mean) SD CV(%)
プール血清 126 4.2 3.3
プール血漿(EDTA) 136 1.3 0.92


マウス検体:CD-1(ICR)、オス、血清

検体 測定値(mean) SD CV(%)
No.1 79.3 2.0 2.6
No.2 77.6 1.2 1.6
No.3 78.4 4.1 5.2
No.4 58.8 2.0 3.5
No.5 51.0 3.3 6.4

 

マウス検体:CD-1(ICR)、オス、血漿(ETDA)

検体 測定値(mean) SD CV(%)
No.1 30.2 2.0 6.7
No.2 139 9.5 6.9
 No.3 65.4 3.8 5.8
 No.4 27.6 2.6 9.5
 No.5 56.9 2.7 4.7


ラット検体:SD、オス、血清

検体 測定値(mean) SD CV(%)
No.1 53.8 1.0 1.9
No.2 153 0.41 0.27
No.3 100 6.4 6.3
No.4 123 4.1 3.4
No.5 104 3.7 3.5

 

ラット検体:SD、オス、血漿(ETDA)

検体 測定値(mean) SD CV(%)
No.1 60.6 5.3 8.8
No.2 70.2 4.3 6.1
 No.3 90.3 6.8 7.5
 No.4 66.2 3.3 5.0
 No.5 72.5 5.1 7.1

単位:mg/dL, n=2

マイクロプレート法

  テスト スタンダード ブランク
発色試薬 300 μL 300 μL 300 μL
試料 検体 2 μL 標準液 2 μL
よく混合し、37℃で5分間加温。ブランクを対照として600 nm*2 における検体及び標準液の吸光度を測定する。

 

用手法

  テスト スタンダード ブランク
発色試薬 3.0 mL 3.0 mL 3.0 mL
試料 検体 20 μL 標準液 20 μL
よく混合し、37 ℃で5分間加温。ブランクを対照として検体及び標準液の吸光度を測定する。比色計:600 nm のフィルター。分光光度計:600 nm*2

*2 2波長測定の場合、主波長600 nm /副波長700 nm。

pdficonLABTRIG-M1 ラボアッセイ トリグリセライド

 

ご使用者様からの情報をお待ちしております

 

酵素法測定試薬 ラボアッセイTM

ALP(用手法)

シバヤギコード
和光コード
品名 検量線範囲 検体量/測定回数 希望納入価格
(消費税別)
LABALP-M1
633-51021
ラボアッセイTM ALP
p-ニトロフェニルりん酸基質法によるアルカリフォスファターゼ活性測定キット
0.0625~0.5 mmol/L 20 μL/ 500回 21,000円

 

Triglyceride(用手法)

シバヤギコード
和光コード
品名 検量線範囲 検体量/測定回数 希望納入価格
(消費税別)
LABTRIG-M1
632-50991
ラボアッセイTM Triglyceride
GPO・DAOS法
100~888 mg/dL 2 μL/ 350回(マイクロプレート法)
20 μL/35回(用手法)
23,000円

 

GLDH:Glutamate dehydrogenase (自動分析装置用試薬)

シバヤギコード
和光コード
品名 測定範囲 検体量/測定回数 希望納入価格
(消費税別)
LABGLDH-RA
631-47771
ラボアッセイ GLDH-ラット(Aタイプ) 1~200 U/L(*) 15 μL/ 150回
(日立LAbOSPECT003の場合)
35,000円
LABGLDH-RC
630-48581
ラボアッセイ GLDH-ラット用コントロール 保存温度:-35℃以下
有効期限:6ヶ月
容量:500μL/1本
20本セット
40,000円

*検量線範囲は100 U/Lまです。直線性は200 U/Lまで確認しています。