りん脂質は糖タンパク質、コレステロールやタンパク質と共に生体膜の主要な構成成分となる脂質です。本品はN-エチル-N-(2-ヒドロキシ-3-スルホプロピル)-3,5-ジメトキシアニリンナトリウム(DAOS)を利用した青色発色系の酵素法試薬です。マイクロプレート法により、マウス血清中のりん脂質量の測定に用いることができます。用手法での測定も可能であり、また、ヒト血清中のりん脂質の測定を行うこともできますが、体外診断用に用いることはできません。

 

キットの構成

構 成 品   容 量
(1) 緩衝液 50 mmol/L グッド緩衝液、pH7.5   50 mL/3 本
(2) 発色剤   50 mL用/3 本







  溶解時  
   ホスホリパーゼD 0.47 units/mL
   コリンオキシダーゼ 2.0 units/mL
   ペルオキシダーゼ 4.2 units/mL
   N-エチル-N-(2-ヒドロキシ-3-スルホプロピル)-3,5-ジメトキシアニリンナトリウム(DAOS) 0.77 mmol/L
   4-アミノアンチピリン 0.24 mmol/L
   アスコルビン酸オキシダーゼ 3.9 units/mL
(3) 標準液 塩化コリン(りん脂質 300 mg/dL相当) 54 mg/dL  5 mL/1 本 

※マイクロプレート法の場合、測定回数は500回、用手法の場合、測定回数は50回

測定原理

検体中のりん脂質(レシチン、リゾレシチン、スフィンゴミエリン)は、ホスホリパーゼD の作用により加水分解され、コリンを遊離します。生成したコリンは、コリンオキシダーゼの作用を受けてベタインに酸化され、同時に過酸化水素を生じます。生成した過酸化水素は、ペルオキシダーゼ(POD)の作用によりDAOS と4-アミノアンチピリンとを定量的に酸化縮合させ、青色の色素を生成させます。この青色色素の吸光度を測定することにより、検体中のりん脂質濃度を求めます。

全血/血清/血漿検体

・ 採取後の検体は速やかに測定してください。

 アルコルビン酸、ビリルビン、溶血は測定値にほとんど影響を与えません。

本法はりん脂質のうちレシチン、スフィンゴミエリン、リゾレシチンを測定しますがケファリンは測定しません。

採血後すぐに測定するか、長期に保存する場合は-35 ℃以下で凍結保存してください。

測定範囲:75.0~596.1 mg/dL

●感度

・ 精製水を試料として測定した場合の吸光度は、0.14以下です。

・ 特定濃度の標準液(りん脂質 300 mg/dL)を試料として測定した場合の吸光度は、0.12 ~ 0.58 です。

●特異性

・ 既知濃度の管理用血清を測定するとき、既知濃度の± 15 %以内にあります。

 

精度試験(アッセイ内変動)

ヒト血清検体 1 2
1 525.6 207.1
2 524.4 213.3
3 517.6 221.7
4 510.5 215.3
5 515.8 212.0
6
515.9 215.6
mean 518.3 214.2
SD 5.7 4.8
CV(%) 1.1 2.2

 

マウス血清検体 1 2
1 591.8 279.0
2 582.4 285.1
3 573.8 286.4
4 583.5 287.9
5 592.2 266.0
6
592.3 270.2
mean 586.0 279.1
SD 7.5 9.1
CV(%) 1.3 3.3

 

ラット血清検体 1 2
1 459.8 144.3
2 458.6 147.4
3 456.7 143.3
4 453.0 145.8
5 444.4 144.6
6
448.1 147.2
mean 453.4 145.4
SD 6.1 1.7
CV(%) 1.4 1.1

単位:mg/dL

再現性試験(アッセイ間変動)

ヒト血清検体

測定日/検体 3 4 5
0日目 525.7 367.4 219.0
1日目 493.1 356.7 201.9
2日目 511.7 363.8 205.9
3日目 500.8 360.1 223.9
mean 507.8 362.0 212.7
CV(%) 2.4 1.1 4.3

 

マウス血清検体

測定日/検体 3 4 5
0日目 589.3 432.8 285.0
1日目 564.5 409.9 256.6
2日目 565.0 410.3 253.1
3日目 569.4 416.1 284.5
mean 572.1 417.3 269.8
CV(%) 1.8 2.2 5.6

 

ラット血清検体

測定日/検体 3 4 5
0日目 461.8 297.6 143.8
1日目 431.8 283.0 139.4
2日目 449.2 296.9 141.8
3日目 435.9 296.7 142.3
mean 444.7 293.6 141.8
CV(%) 2.6 2.1 1.1

単位:mg/dL

添加回収試験

ヒト血清検体

添加量 測定値 回収量 回収率(%)
216.6
152.4 361.6 145.0 95.2
204.2 412.4 195.8 95.9
262.3 462.8 246.2 93.9
314.2 521.9 305.3 97.1


マウス血清検体

添加量 測定値 回収量 回収率(%)
285.3
152.4 438.1 152.8 100.2
204.2 486.6 201.3 98.6
262.3 532.0 246.7 94.0
314.2 601.3 316.0 100.6


ラット血清検体

添加量 測定値 回収量 回収率(%)
138.1
152.4 291.0 152.9 100.3
204.2 345.1 207.0 101.4
262.3 395.4 257.3 98.1
314.2 459.7 321.6 102.3

単位:mg/dL

 

希釈直線性試験

測定範囲に入るよう付属の緩衝液で調製後、連続的に緩衝液で4段階希釈し測定した結果。
希釈直線性(ヒト血清検体と血漿(EDTA)検体)R2は0.9996と0.9989
希釈直線性(マウス血清検体と血漿(EDTA)検体)R2は0.9999と0.9996
希釈直線性(ラット血清検体と血漿(EDTA)検体)R2は0.9998と0.9996

検体測定例

ヒト検体

検体 測定値(mean) SD CV(%)
プール血清 231.9 11.4 4.9
プール血漿(EDTA-2K) 211.8 11.0 0.5


マウス検体:CD-1(ICR)、血清

検体 測定値(mean) SD CV(%)
No.1 241.0 1.60 0.7
No.2 213.9 0.44 0.2
No.3 183.1 3.30 1.8
No.4 198.1 4.86 2.5
No.5 171.0 5.97 3.5

 

マウス検体:CD-1(ICR)、血漿(ETDA-2K)

検体 測定値(mean) SD CV(%)
No.1 111.4 4.45 4.0
No.2 122.9 1.61 1.3
 No.3 103.4 5.15 5.0
 No.4 115.0 7.41 6.4
 No.5 134.8 0.58 0.4


ラット検体:SD、血清

検体 測定値(mean) SD CV(%)
No.1 134.6 4.28 3.2
No.2 199.3 2.88 1.4
No.3 168.5 1.62 1.0
No.4 160.0 0.33 0.2
No.5 163.5 3.52 2.2

 

ラット検体:SD、血漿(ETDA-2K)

検体 測定値(mean) SD CV(%)
No.1 97.7 1.84 1.9
No.2 122.8 5.82 4.7
 No.3 107.9 2.35 2.2
 No.4 116.0 7.50 6.5
 No.5 121.6 10.9 8.9

単位:mg/dL, n=2

マイクロプレート法

  テスト スタンダード ブランク
発色試薬 300 μL 300 μL 300 μL
試料 検体 2 μL 標準液 2 μL ― 
よく混合し、37℃で5分間加温。ブランクを対照として検体及び標準液の吸光度を測定する。主波長600 nm/副波長700 nm

 

用手法

  テスト スタンダード ブランク
発色試薬 3.0 mL 3.0 mL 3.0 mL
試料 検体 20 μL 標準液 20 μL ― 

よく混合し、37 ℃で5分間加温。ブランクを対照として検体及び標準液の吸光度を測定する。

比色計:600 nm のフィルター

分光光度計:主波長600 nm /副波長700 nm

注:用手法で測定した場合、50 回用となります

 

pdficonLABPLIP-M1 ラボアッセイ りん脂質

 

SDS Japanese  /  English

ご使用者様からの情報をお待ちしております

 

 

酵素法測定試薬 ラボアッセイTM

ALP(用手法)

シバヤギコード
和光コード
品名 検量線範囲 検体量/測定回数 希望納入価格
(消費税別)
LABALP-M1
633-51021
ラボアッセイTM ALP
p-ニトロフェニルりん酸基質法によるアルカリフォスファターゼ活性測定キット
0.0625~0.5 mmol/L 20 μL/ 500回 21,000円

 

Cholesterol(用手法)

シバヤギコード
和光コード
品名 検量線範囲 検体量/測定回数 希望納入価格
(消費税別)
LABCHO-M1
635-50981
ラボアッセイTM Cholesterol
コレステロールオキシダーゼ・DAOS法
50~592.2 mg/dL 2 μL/ 500回(マイクロプレート法)
20 μL/50回(用手法)
21,000円

 

Glucose(用手法)

シバヤギコード
和光コード
品名 検量線範囲 検体量/測定回数 希望納入価格
(消費税別)
LABGLUC-M1
638-50971
ラボアッセイTM Glucose
ムタロターゼ・GOD法
50~500 mg/dL 2 μL/ 500回(マイクロプレート法)
20 μL/50回(用手法)
23,000円

 

Triglyceride(用手法)

シバヤギコード
和光コード
品名 検量線範囲 検体量/測定回数 希望納入価格
(消費税別)
LABTRIG-M1
632-50991
ラボアッセイTM Triglyceride
GPO・DAOS法
100~888 mg/dL 2 μL/ 350回(マイクロプレート法)
20 μL/35回(用手法)
23,000円

 

GLDH:Glutamate dehydrogenase (自動分析装置用試薬)

シバヤギコード
和光コード
品名 測定範囲 検体量/測定回数 希望納入価格
(消費税別)
LABGLDH-RA
631-47771
ラボアッセイ GLDH-ラット(Aタイプ) 1~200 U/L(*) 15 μL/ 150回
(日立LAbOSPECT003の場合)
35,000円
LABGLDH-RC
630-48581
ラボアッセイ GLDH-ラット用コントロール 保存温度:-35℃以下
有効期限:6ヶ月
容量:500μL/1本
20本セット
40,000円

*検量線範囲は100 U/Lまです。直線性は200 U/Lまで確認しています。